1 范围
本标准规定了用荧光法和反相高压液相色谱法测定维生素B , 的方法。
本标准方法一适用于乳粉中维生素B ， 的测定; 方法二适用于婴幼儿配方食品和乳粉中维生素B , 的测定。
方法一 荧光法
2 方法原理
样品在稀盐酸溶液中消化， 过滤， 除去蛋白质等物质。如果样品中维生素B , 系游离态， 可直接在碱
性铁抓化钾中氧化成唾咯色素， 在紫外光照射下发出荧光， 其荧光强弱与唾呛色素成正比; 如果维生素
B , 系结合态， 则须经酶解转为游离态， 层析除去杂质后再作荧光检测。检测所使用的激发波长E : 为
3 6 5 n m， 发射波长E M 为4 3 5 n m,
3 试荆
所有试剂， 如未注明规格， 均指分析纯; 所有实验用水， 如未注明其他要求， 均指三级水。
3 . 1 盐酸: c  ( H C 1 ) 为0 .  l mo l / L,
3 . 2 氢氧化钠: c  ( N a O H) 为1 5 0 g / L >
3 . 3 异丁醇: 重燕馏。
3 . 4 乙酸钠: c ( Na Ac ) 为2 mo l / L。
3 . 5 酸性乙醉: 体积分数为2 0 %。用盐酸调节p H为3 . 5 -4 . 3 .
3 . 6 淀粉酶( 生化试剂) 溶液: l 0 0 g / L。
3 . 7 中性抓化钾: c ( K C I ) 为2 5 0 g / L ,  2 5 0 g 氯化钾溶于1 0 0 0 mL水中。
3 . 8 酸性抓化钾: c ( K C 1 ) 为2 5 0 g / L 。加8 .  5 mL盐酸于1 L中性氯化钾溶液中。
3 . 9 铁氛化钾: c [ K 3 F e ( C N) s 〕 为1 0 g / L ， 使用当天配制。
3 . 1 0 载化剂。
3 . 1 1 标准溶液
3 . 1 1 . 1维生素B , 标准贮备液， 浓度为1 0 0 p g / m L ,

准确称取5 0 .  O m g ( 在五氧化二磷干燥器内至恒量的) 分析纯维生素B , 盐酸盐， 溶解于4 0 0 m L左右
体积分数为2 0 写的酸性乙醇溶液( 3 . 5 ) 中， 并定容于5 0 0 m L棕色容量瓶中， 于1 0 ℃ 左右贮存。
取4 毫升l o g / L的铁银化钾( 0. 9 ) ， 用1 5 0 g / L的氢氧化钠溶液( ( 3 .  2 ) 稀释至1 0 0 m L ， 配好后置于暗

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Infant food-test	婴幼儿配方食品和乳粉维生素B1的测定	153 Kb